Plant Cell Technology（PCT）：PPM植物組培抗菌劑

植物的組織培養廣義又叫離體培養，是20世紀初發展起來的一門新興技術。植物組織培養是一種在無菌條件下，將植物的組織或細胞培養在人工培養基上進行生長和繁殖的技術。它涉及將植物的組織（如葉片、莖、根、胚等）或細胞分離出來，并在含有營養物質、激素和其他必要成分的培養基中進行培養。植物組織培養可以用于多種目的，包括：

1. 植物繁殖：通過植物組織培養，可以實現植物的無性繁殖，如愈傷組織培養、離體芽培養和胚培養等。

2. 基因轉化：利用植物組織培養技術，可以將外源基因導入植物細胞中，實現植物的基因轉化，以獲得具有特定性狀的轉基因植物。

3. 病毒檢測和病毒清除：通過植物組織培養，可以檢測植物中存在的病毒，并進行病毒清除，以保證植物的健康和繁殖性。

4. 植物生理研究：植物組織培養可以用于研究植物的生理過程、激素調控、生長發育和代謝途徑等。

植物組織培養技術在植物育種、研究和工業生產等領域具有廣泛的應用。它為研究植物生物學、改良植物性狀和保護植物資源提供了有力的工具。

在植物組織培養中，污染指的是在培養過程中出現的非預期的微生物、真菌、細菌或其他外來物質的存在。這些污染物可能來自環境、操作人員、培養基或培養器具等。植物組織培養的無菌條件是非常重要的，因為任何污染都可能對培養物的生長和發育產生不利影響。面對植物組培污染問題，我們通常采取在培養基中加入適量的抗生素（如青霉素、鏈霉素、氯霉素等）來抑菌。但是抗生素一般不穩定，遇酸、堿或加熱都易分解而失去活性。而且單一抗生素抑菌容易產生抗藥性，一旦停止使用，污染率就會顯著上升。同時，高濃度的抗生素還會影響植物的生長。

為解決上述問題，我們推薦專業植物組培高效廣譜性抗菌劑PPM，它可以有效預防和清除由于空氣、滅菌不徹底、交叉污染、外植體消毒等各種原因導致的植物組培苗的真菌、細菌、內生菌和農桿菌污染?？梢约尤肱囵B基高溫滅菌；在合理使用劑量下，不會對植物的生長產生任何影響。

作為Plant Cell Technology（PCT）在中國區域的代理商，艾美捷科技將為中國客戶提供全面的Plant Cell Technology（PCT）產品以及客戶訂制化服務。歡迎大家隨時聯系我們。

Plant Preservative Mixture (PPM) 使用方法

一．常規污染預防用量

一般推薦使用濃度為0.05%-0.2%（1L培養基中加入0.5-0.75ml PPM）；愈傷增殖， 器官形成，胚性組織發育等使用濃度為0.05%-0.075%。

二．植物內生菌污染處理

1. 種子：PPM不推薦用于直接處理含有大量的細菌或真菌孢子的種子滅菌；對于種子離體萌發，建議先采用傳統方法消毒，然后置于含 2-3%PPM的全培養基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20和調節pH，處理完成以后直接插入含有 PPM(草本植物0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養基里進行培養。

2. 外植體：以 1cm 外植體為例，將外植體置于含 4-5%PPM的全培養基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加 Tween20和調節pH，處理完成以后直接插入含有PPM(草本植物 0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養基里進行培養。

3. 塊莖，球莖和鱗狀物的觀賞植物樣本：將其整體放入消毒劑中攪拌消毒處理以后， 用水沖洗干凈，將材料切成薄片，置于含 4-5%PPM的全培養基礎鹽培養液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20 和調節pH，處理完成以后無需沖洗直接插入含有 0.1-0.2%的PPM的培養基里進行培養。

三．經過處理效果不理想的樣本

如果厚的外植體、污染嚴重的植株、種子等樣本經過以上處理仍得不到理想效果，可嘗試以下操作：

1. 將材料浸泡在水中持續攪拌處理(松軟組織攪拌1小時，硬實組織攪拌2小時)。

2. 將材料在含50%的PPM全培養基礎鹽溶液中攪拌處理5-10分鐘，此過程千萬不能添加 Tween20 和調節pH。

3. 無需沖洗，將處理過的材料直接加入到培養基中即可。對于真菌污染，可在培養基中加入適當濃度的PPM。對于真菌細菌混合性污染，建議在培養的第一個月的培養基中加入0.05%-0.2%的PPM。

四．嚴重污染材料污染去除與搶救（重污染不超過一周）

1. 將污染的材料至于流水中用軟刷刷洗，然后置于含50% PPM的無菌水溶液中攪5-15分鐘；對于細菌或者混合性污染，建議使用 100% PPM與 0.6g/L 的檸檬酸無菌水溶液按 1：1 混合的低 pH(2.8-3.2)的酸性溶液處理。

2. 處理后的材料無需清洗，直接插入含0.05%-0.25的PPM的培養基中培養至少一個月以上，其中前10天需要弱光培養。

五．農桿菌的去除

共培養以后，將樣本用無菌水清洗，然后將樣本浸沒在 100% PPM（補充4X的培養基鹽溶液）中處理2分鐘，取出后用無菌紙吸干后并置于常用抗性培養基中培養，3 周后，更換到只含有0.05%-0.075% PPM(無常用抗生素)的培養基中培養。

注意事項：

1. 在所有 PPM消毒處理外植體的過程中，盡量保證容器的體積足夠大，并使外植體材料所有面積與含PPM的處理溶液充分接觸，以保證消毒效果；

2. 如果外植體出現高度氧化現象，不要扔棄，大約50%的外植體在 4-6 周內即可恢復；

3. 50% PPM 的處理溶液可以重復使用但是不推薦，因為使用次數和效果受外植體的體積與接種密度的影響。將50% PPM的處理溶液保存在4?C可適當延長其活性，一般可使用不超過10次。如果必要，建議配制2份50% PPM溶液，一份用于外植體消毒內生菌污染，另一份用于消除“培養過程中”的輕度污染材料搶救，第二份溶液在每次處理過后需要用 0.2mm濾器過濾；

4. 如果50%PPM溶液處理效果不理想，可采用100%PPM溶液進行處理，處理方法相同，但使用次數不得超過10次。

來自Plant Cell Technology,Inc(PCT)官網，更多數據請在官網搜索。

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美國Plant Cell Technology（PCT）公司為商業及研究用植物組織培養實驗室和植物種植者開發和生產了旗艦產品PPM (Plant Preservative Mixture)，它是一種廣譜抗微生物劑，可以殺死細菌和真菌細胞，防止真菌孢子的萌發，并在較高濃度下能消除內源性污染的外植體。PPM能有效地抑制植物細胞和植物組織培養中的通過空氣、水、人傳播的微生物污染及內源性污染，而不會影響體外種子發芽、愈傷組織增殖和愈傷組織的再生。并且，PPM具有熱穩定性，可以和培養基一起滅菌，同時比常用抗生素價格更低廉，可以作為植物組織培養基的標準成分。

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