Arbor Assays：Myelophil

文獻標題：Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model

DOI：https://doi.org/10.1186/s12906-025-04882-2

研究背景

疲勞是一種常見的癥狀，可分為急性、長期和慢性疲勞。慢性疲勞對生活質量有顯著影響，尤其是在癌癥患者和患有肌痛性腦脊髓炎/慢性疲勞綜合征（ME/CFS）的人群中。中樞疲勞與神經肌肉功能障礙相關，主要由大腦的生化變化引起。其主要機制被認為是大腦中5-HT和多巴胺（DA）的失衡。5-HT在大腦的多種生理和心理功能中起關鍵作用，其水平異常升高可能導致中樞疲勞。Myelophil是一種基于韓國傳統醫學經驗開發的補充劑，用于治療疲勞相關疾病。先前的研究已證實其在抗肌肉疲勞、抗神經炎癥和抗氧化等方面的作用，但其對中樞疲勞的具體機制尚不清楚。

研究目的

本研究旨在通過氟西汀（一種選擇性5-HT再攝取抑制劑，SSRI）誘導的5-HT過度活躍小鼠模型，探討Myelophil的抗中樞疲勞效應及其潛在機制。

研究方法

1. Myelophil的制備和標準化：通過30%乙醇提取黃芪根和丹參根，按照韓國食品藥品管理局（KFDA）的良好生產規范（GMP）指南生產Myelophil，并通過超高效液相色譜（UHPLC）和液相色譜-質譜聯用（LC/MS）進行分子指紋分析。

2. 動物實驗設計：使用9周大的雄性C57BL/6J小鼠，隨機分為5組，每組8只。分別為生理鹽水組、氟西汀組、Myelophil 100 mg/kg組、Myelophil 50 mg/kg組和陽性對照組（維生素C 100 mg/kg）。氟西汀通過腹腔注射給藥4周，同時各組分別給予相應的口服處理。

3. 行為測試：通過巢筑測試、輪跑測試、旋轉桿測試、足底測試和曠場測試評估小鼠的疲勞相關行為、運動能力、焦慮和疼痛敏感性。

4. 血清皮質酮水平測定：通過ELISA試劑盒測定血清中皮質酮水平。

5. 免疫熒光染色和西方印跡分析：用于檢測大腦中5-HT水平及相關蛋白（如5-HT轉運體、單胺氧化酶A等）的表達。

實驗結果

1．Myelophil對疲勞相關行為的影響：氟西汀處理的小鼠表現出疲勞相關行為，如巢筑評分降低、輪跑測試中運動距離和潛伏時間減少。Myelophil（100 mg/kg）顯著改善了這些疲勞相關行為，但50 mg/kg劑量的Myelophil和陽性對照組（維生素C）未觀察到顯著效果。

2．Myelophil對焦慮和疼痛敏感性的影響：氟西汀處理增加了小鼠的疼痛敏感性和焦慮行為，而Myelophil（100 mg/kg）顯著減輕了疼痛敏感性，但對焦慮行為無顯著影響。

3．Myelophil對血清皮質酮水平的影響：氟西汀處理降低了血清皮質酮水平，而Myelophil處理有恢復的趨勢，但未達到統計學顯著性。

4．Myelophil對5-HT過度活躍的影響：免疫熒光染色顯示，氟西汀處理使小鼠腦中5-HT水平升高約1.4倍，而Myelophil（100 mg/kg）顯著降低了這種升高。此外，Myelophil還顯著調節了5-HT合成/釋放相關蛋白（如TPH2、5-HT1AR、VMAT2和MAO-A）的表達，并增加了5-HT再攝取相關蛋白（5-HTT）的表達。

5．Myelophil對BDNF活性的影響：氟西汀處理抑制了BDNF蛋白表達，而Myelophil（100 mg/kg）顯著逆轉了這種抑制，并通過調節相關分子（如TrkB、p-CREB和c-Fos）發揮作用。

在文獻《Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model》中，Corticosterone Multi-Format ELISA Kit 的主要應用是用于測定小鼠血清中皮質酮（Corticosterone）的水平。具體應用如下：

評估氟西汀（Fluoxetine）處理對小鼠血清皮質酮水平的影響，以及Myelophil干預是否能夠調節這種變化。皮質酮是一種重要的應激激素，其水平的變化可以反映機體的應激狀態。

使用 Corticosterone Multi-Format ELISA Kit（貨號K014-H，Arbor Assays），通過酶聯免疫吸附測定（ELISA）技術定量檢測小鼠血清中的皮質酮水平。該試劑盒采用競爭性ELISA方法，通過特異性抗體與皮質酮結合，利用酶促反應產生的顏色變化來定量檢測皮質酮。經過4周的氟西汀處理，小鼠血清中皮質酮水平顯著降低，約為正常水平的0.6倍。Myelophil（100 mg/kg）處理有恢復血清皮質酮水平的趨勢，但未達到統計學顯著性。該結果表明，氟西汀誘導的中樞疲勞模型中，小鼠的應激反應受到抑制，表現為血清皮質酮水平下降。

Myelophil雖然未能顯著恢復皮質酮水平，但其對其他疲勞相關行為和神經生物學指標的改善作用提示其可能通過其他機制發揮抗疲勞效應。

試劑盒特點

高靈敏度：能夠檢測低至20.9 pg/mL的皮質酮。

多格式：適用于不同樣本量的檢測，提供50 ?L和100 ?L兩種檢測格式。

適用范圍廣：可用于檢測血清、血漿、尿液、呼吸蒸汽、組織培養基等多種樣本類型。