Biosensis 示蹤試劑-可視化神經退行性疾病通路

Biosensis提供了大量已建立且特性良好的示蹤試劑，用于檢測退化神經元（Fluoro-Jade B和C）、淀粉樣斑塊（Amylo-Glo和HQ-O）以及正常和致病的髓鞘（Black Gold II）。這些染色試劑是出色的研究工具，為研究神經退行性疾病通路和疾病修飾藥物提供了最大的靈活性。

Biosensis 示蹤試劑具有幾個關鍵優勢：

• 在高影響力期刊上發表過大量文章 – 質量得到同行的驗證

• 詳細的方案 – 易于使用的試劑保證有效

• 出色的技術支持 – 確保您的實驗成功

• 靈活性 – 與各種組織類型、染色技術和現有抗體免疫染色方案兼容

使用 Fluoro-Jade B 和 C 鑒定退化神經元

神經元變性的原因和影響是各種神經科學家的主要興趣。與這種興趣相對應的是越來越多的適用于檢測神經元變性的方法。Fluoro-Jade B （FJB） 和 C （FJC） 示蹤試劑可對所有退化神經元進行染色，無論細胞死亡的具體損傷或機制如何。

左圖：老年糖尿病大鼠海馬體 CA3 區退化神經元的Fluoro-Jade C （FJC） 染色（綠色）。藍色：DAPI 細胞核染色。圖片由 Wang 博士及其同事提供 （Wang S. et al. （2020））。

右：使用藍色和紫外線落射熒光聯合照明對暴露于紅藻氨酸的扣帶回大鼠皮層的表層進行雙重曝光。第 I 層包含明顯的 Fluoro-Jade C 陽性退化軸突末端。第 II 層包含密集堆積的 DAPI 陽性活顆粒細胞。第 III 層包含 FJC 陽性去殼錐體細胞和 DAPI 陽性活錐體細胞的混合物。照片由 Larry Schmued 博士提供。

FJC 表現出最大的信噪比和最高的分辨率。這轉化為對退化神經元具有最大對比度和親和力的染色，使其成為定位退化神經細胞體以及遠端樹突、軸突和末端的理想選擇。該染料具有很強的抗褪色性，并且幾乎與所有組織學處理和染色方案兼容。

熒光染料 Fluoro-Jade B （FJB） 與其純化程度更高的兄弟 FJC 一樣，是一種陰離子熒光素衍生物，可用于對正在變性的神經元進行組織學染色。FJB 與 FJC 的不同之處在于，它是一種略不精細的化學配方，因此它不能提供與 FJC 相同水平的信噪比或高分辨率。盡管如此，FJB 仍然被廣泛使用，并且作為退化神經元甚至神經膠質細胞的標志物效果非常好（參見 Damjanac M 等人，2007 年）。FJB 的方案與 FJC 幾乎相同，并且 FJB 與其他幾種標記程序兼容，包括免疫熒光和熒光尼氏技術。

Biosensis Fluoro-Jade B 和 C 示蹤試劑有以下規格可供選擇：

注意：TR-150-FJ 相當于 Merck-Millipore 的停產產品 AG310，R-160-FJ相當于 Merck-Millipore 的停產產品 AG325。

用 Amylo-Glo 和 HQ-O 識別淀粉樣蛋白斑塊

Amylo-Glo 即用型稀釋 （RTD） 染色試劑 （TR-300-AG） 設計用于對組織切片中的淀粉樣蛋白斑塊進行染色。由于其獨特的化學和光譜特性，該標記物與其他常規標記物（如硫黃素 S 和剛果紅）相比具有幾個優勢（Schmued L等人，2012 年）。使用 Amylo-Glo 在生理條件下會產生非常亮的藍色紫外線激發染色劑，當用其他濾光片照射時不會滲出。其亮度使其成為低倍率定量研究的理想選擇，而其獨特的激發/發射曲線和溫和的染色條件使其成為多種免疫熒光標記研究組合的理想選擇。Amylo-Glo RTD 與新鮮、冷凍和福爾馬林固定的免疫組織化學或免疫細胞化學兼容，由于其高熒光強度、高抗光漂白性和獨特的紫外通道熒光特性，它特別適用于共聚焦和多重標記。

左圖：三重暴露允許在 AD/Tg 小鼠的海馬體中同時定位 Amylo-Glo 陽性淀粉樣蛋白斑塊（藍色）、GFAP 陽性肥大星形膠質細胞（綠色）和活化的小膠質細胞（紅色）。紫外線、藍光和綠光照明相結合。

右：在 AD/Tg 小鼠海馬的齒狀回區域用溴化乙錠尼氏（細胞體）復染劑（紅色）標記淀粉樣斑塊（藍色）的淀粉樣蛋白斑塊（藍色）。

含 EtBr 復染劑的 Biosensis Amylo-Glo RTD 淀粉樣蛋白斑塊染色試劑 （TR-400-AG） 試劑盒利用溴化乙錠復染劑，以一種快速有效的方式可視化細胞核和細胞體，同時在紫外線照射下，可一步評估淀粉樣蛋白斑塊和細胞/組織定位。

HQ-O 即用型稀釋 （RTD） 示蹤試劑設計用于標記石蠟包埋或新鮮切割的冷凍組織切片中的淀粉樣斑塊。作為一種熒光鋅螯合劑，HQ-O 是獨一無二的，因為它利用了淀粉樣蛋白斑塊中已知存在的濃縮鋅。對 HQ-O 的研究表明，只有在鋅存在下聚集合成的 Aβx-42 時，才能看到熒光斑塊狀結構。在藍光激發下，斑塊結構在腦實質中呈亮綠色熒光，與 Aβ 抗體染色后觀察到的斑塊結構密切相關。HQ-O RTD 染色試劑與其他熒光基團兼容，如 DAPI、Hoechst 和溴化乙錠，以及熒光顯微鏡發射光譜在藍色和/或紅色發射范圍內的熒光標記抗體。由于其鋅螯合特性，HQ-O RTD^TM染色試劑可以顯示血管內的球狀結構和血管內白細胞。

D：在海馬體的 CA4 區域內，使用 GFAP 抗體進行共標記證明了肥大的星形膠質細胞（橙色）與它們通常周圍的淀粉樣斑塊（綠色）之間的關系。用 TRITC 熒光團觀察 GFAP 免疫反應性。

E：在阿爾茨海默病患者的皮層中可以看到三個淀粉樣斑塊（綠色）。

F：人類 AD 患者皮層中的血管斑塊示例。

HQ-O RTD 染色試劑與硫黃素 S 等舊的藍光激發染色劑相比具有多種優勢：

• HQ-O 與淀粉樣蛋白原纖維和噬菌斑結合，無需通過獨特的鋅結合特性進行確認

• 與硫黃素 S、硫黃素 T 和剛果紅相比，具有更高的對比度和分辨率

• 具有緊密的激發和發射光譜，無激發物滲漏，可輕松進行清晰的多重標記研究

• 使用常見的藍光（FITC 熒光）濾光片 （E_麥克斯475 納米）

• 與 FFPE 和冷凍組織切片兼容

• 比任何其他非紫外線淀粉樣染料更容易、更銳利、更亮！

Biosensis 淀粉樣蛋白噬菌斑示蹤試劑有以下規格可供選擇：

用Black-Gold II鑒定正常和致病的髓鞘

Black-Gold II 是一種鹽代磷酸鹽復合物，可將髓鞘定位在中樞神經系統內。Black Gold II 即用型稀釋 （RTD） 染色試劑盒可定位髓鞘，包括單個纖維和髓束，并可選擇通過甲苯胺藍復染劑共定位細胞體。黑金 II 標記的有髓纖維在明場照明下看起來幾乎是黑色的，而甲苯胺藍 O 標記的細胞尼氏體是藍色的。

Black Gold II 可以顯示和表征與暴露于多種神經毒物相關的特定髓鞘變化，包括紅藻酸、軟骨藻酸、3-硝基丙酸、氟金和異煙肼。Black Gold II 還可以與其他組織化學標志物結合使用，包括尼氏染色、逆行轉運熒光示蹤劑和神經元變性的熒光標志物。Black-Gold II 的相關優勢包括高分辨率、高對比度、組織化學處理時間短、多功能性和一致的可重復性。

左圖：8 個月大的 Ad-Tg 小鼠海馬體的明場照明 （60X）。髓鞘病理可以在淀粉樣蛋白斑塊內和周圍觀察到。相鄰顆粒和多晶型細胞的細胞體呈藍色，而單個髓鞘纖維呈近黑色。照片由 L. Schmued 博士提供。

右：延髓中人腦 K 位點降鈣素基因相關肽樣免疫反應性（黑色）和髓鞘染色（紅色，Black-Gold II 染色試劑盒，Biosensis），顯示背柱核 Locus K 和脊髓三叉神經質明膠的相似神經化學和結構組織（Del Fiacco M. et al.， 2018）。

Biosensis正常和致病性髓鞘示蹤試劑有以下大小可供選擇：