Jena Bioscience：生物素（Biotin）和地高辛（Digoxin）

由于其的安全性、穩定性和便利性，半抗原生物素（Biotin）和地高辛（Digoxin）是用于生成用于原位雜交、基因表達分析或電泳遷移率變化實驗（Electrophoretic Mobility Shift Assays，簡稱EMSA）的核酸探針的極為常見標簽之一。

這些標簽通過標記的核苷酸，可以直接（使用生物素化/地高辛化的核苷酸）或間接（通過合并帶有活性基團的核苷酸類似物，隨后進行生物素化/地高辛化）酶促反應引入到DNA和RNA中。隨后，生物素標記的探針可以通過與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的鏈霉親和素、堿性磷酸酶（AP）或熒光染料檢測，而地高辛化通常通過HRP或AP修飾的抗體來可視化。

對于大多數應用來說，生物素是首選標簽。然而，在某些情況下，生物樣本中內源性的生物素可能會干擾檢測，導致高背景或甚至假陽性。在這些情況下，建議使用地高辛，這是一種僅在洋地黃植物中存在的類固醇。

核酸標記是通過體外聚合反應實現的，例如聚合酶鏈反應（PCR）。四種天然脫氧核苷酸（dNTPs）或核苷酸（NTPs）中的一種（或多種）被部分替換為帶有連接物的類似物，該連接物將標簽連接到核苷酸部分的特定位置。這要求核苷酸類似物與聚合酶以及目標序列兼容。由于這種兼容性取決于：1）被替換的核苷酸類型和連接物附著位置，2）連接物的類型（結構）以及連接物的長度。

理論上，可能存在非常多的類似物。然而，在實踐中，這被減少到一組已被證明對大多數都能產生良好標記結果的類似物。特別突出的類似物是在其5位被修飾的尿苷三磷酸，其次是5位被修飾的胞苷三磷酸，以及在7-去氮或N6位置有替換的腺苷三磷酸。關于連接物的類型（結構），脂肪族氨基烯丙基、炔丙基氨基和氨基己基連接物已被證明不會參與Watson-Crick堿基配對，因此能夠產生良好的雜交結果。

除了連接物的結構，連接物的實際長度也顯著影響探針的產量、標簽的結合以及標簽可視化的靈敏度和可重復性。一般來說，短連接物會產生豐富的探針產量，但可能會阻礙標簽的結合和/或探針表面標簽的充分可及性，而長連接物則會增加標簽對檢測試劑的可及性，但會導致探針產量降低。目標是在結合率和檢測效率之間達到合適的平衡，這通常通過使用11個原子或16個原子的連接物來實現。

DNA/cDNA標記（DNA/cDNA Labeling）：

通過標準的酶促技術，如聚合酶鏈反應（PCR）、缺口翻譯（Nick Translation）、引物延伸（Primer Extension）或末端脫氧核苷酸轉移酶（Terminal deoxynucleotidyl Transferase，簡稱TdT）介導的3'端標記和逆轉錄（cDNA探針），可以生成隨機和定點生物素化/地高辛化的DNA和cDNA探針。DNA探針標記主要通過PCR、缺口翻譯或引物延伸進行，并應用于原位雜交或DNA微陣列技術。3'端標記的典型應用包括TUNEL（凋亡的原位定位）或電泳遷移率變化實驗（EMSA）實驗。逆轉錄法標記cDNA通常用于基因表達分析的DNA實驗中。

Jena Bioscience提供了多種具有不同連接體長度的半抗原標記的((d)d)NTP類似物，這使得能夠為特定應用選擇合適匹配的產品。

用于DNA標記的生物素化核苷酸：

用于DNA標記的地高辛/二硝基苯酚修飾的核苷酸：

特殊備注說明：

PCR: Polymerase chain reaction with Taq Polymerase（Taq聚合酶的聚合酶鏈式反應）;

NT: Nick Translation with DNAse I / DNA Polymerase I（DNA酶I/DNA聚合酶I的Nick翻譯）;

Primer Extension: Primer Extension with Klenow 3'-5'exo-（Klenow 3'-5'exo-引物延伸法）;

3'-End Labeling: Incorporation with Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT)（摻入末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT））;

RT: Reverse Transcription with Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase (MMLV RT)（用莫洛尼鼠白血病病毒逆轉錄酶（MMLV RT）進行逆轉錄）.

1: in-house tested（內部測試）

2: external reference (see datasheet)（外部參考(見數據表)）

n/a: no data available（無資料）

- : not applicable（不適用） 

看到這兒，您心動了嗎？馬上聯系小艾吧！

Jena Bioscience成立于1998年，由德國馬普研究所（MPI）的分子生理學家共同創立。該生物公司致力于為全球科研機構、醫院、醫學院、制藥企業和診斷試劑盒生產企業提供各種研發和臨床前生物試劑。憑借其強大的科研實力和前沿的學術研究水平，Jena Bioscience已發展成為一個擁有完整生物試劑產品線、超過7500種產品的跨國企業，為全球50多個國家的客戶提供生物試劑服務。

Jena Bioscience的主要產品包括核苷/核酸制品系列（包括合成的類似物）、重組蛋白及蛋白表達系統、點擊化學產品系列、在結構學研究方面全面提供晶體篩選試劑盒、優化試劑、工具和各類耗材等。此外，還提供分子生物學和生物化學研究的定制試劑與研究服務。

武漢艾美捷科技有限公司，簡稱艾美捷，擁有進出口資質和自己的國際物流，與國內外90余家知名的試劑、原料及技術服務供應商深度合作，是國內生物制藥企業、診斷企業、跨國藥企、各大高校院所采購平臺的首選定供應商。