Biogradetech：類器官專用，基質膠（腸道/肺/腦/腫瘤類器官等）

基質膠作為一種重要的細胞外基質，具有廣泛的應用價值。它可以用于各種研究領域，如細胞生物學、組織工程、腫瘤研究等?；|膠的特殊成分和結構為細胞提供了理想的生長環境，促進細胞的黏附、遷移和增殖。同時，基質膠還可以模擬人體組織的結構和功能，為研究人員提供了重要的工具。

Biogradetech類器官專用基底膜基質膠是經過精選的，用于器官樣結構培養，如果你在使用其他類型的基質膠時遇到無法培養的器官樣結構，使用這款基底膜基質系列可以確保實驗的有效性和重復性。例如，小鼠腸道類器官、肺類器官、人腦類器官等。

基底膜基質的應用廣泛，不僅可以促進細胞的生長和分化，還可以模擬真實的組織環境，為研究細胞行為和疾病機制提供重要工具。無論是進行管狀結構形成實驗、器官樣結構形成實驗還是腫瘤器官樣結構形成實驗，基底膜基質都能發揮重要作用。

如果您對細胞培養和類器官研究感興趣，那么Biogradetech類器官專用基質膠絕對是你的得力助手。它將為你的實驗提供可靠的支持，幫助你揭開細胞行為和組織發育的奧秘。趕快嘗試Biogradetech類器官專用基質膠，開啟細胞培養的新篇章吧！

作為Biogradetech在中國區域的獨家代理，艾美捷科技將為中國客戶提供全面的Biogradetech產品以及客戶訂制化服務。歡迎大家隨時聯系我們。

產品英文名稱：For Organoid Culture, Basement Membrane Matrix

產品中文名稱：類器官專用，基質膠（腸道/肺/腦/腫瘤類器官等）

貨號：A-MGL55

規格：5mL、10mL

儲存條件：≤-20°C

產品描述：

Biogradetech貨號A-MGL55類器官專用的基質膠是一種連續的特殊細胞外基質薄膜，形成了內皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經細胞與其相鄰基質之間的界面?；|膠在發育和傷口愈合過程中會被降解和再生。它不僅支持細胞和細胞層，還對組織結構起著重要作用，影響細胞的粘附、遷移、增殖和分化?；|膠能夠成為轉移性腫瘤細胞侵襲的主要屏障。

Biogradetech貨號A-MGL55類器官專用的基質膠是從Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）腫瘤中純化得到的可溶性基質膠。此基質膠在37°C下形成重組基底膜基質膠。此基質膠的主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、粘連素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

適用范圍：

這是經過精選的被證明用于類器官培養的基底膜基質膠。如果你遇到其它類型的基質膠無法成功培養器官樣結構，使用這款基質膠可以保證實驗的有效性和可重復性。例如，小鼠腸道類器官、肺類器官、人腦類器官等。  

產品參數：

來源：小鼠腫瘤；

1.顏色：含酚紅的基質膠呈黃粉色，無酚紅的基質膠呈半透明淡黃色；

2.形態：標準型基質膠在4°C下溶解為透明液體；高濃度基質膠在0°C下溶解后為透明液體，長時間放置于4°C后會半凝膠化。

3.濃度：蛋白質濃度范圍為8至26 mg/mL。

4.內毒素：≤ 4.5 EU/mL

5.凝膠時間：室溫下5-30分鐘凝膠，當溫度從22°C升至37°C時，凝膠形成速度加快。

包被涂層方法：

打造成功的細胞培養環境，關鍵在于選擇合適的基質膠。其中，基質膠的包被涂層方法對于不同的應用需求有所不同。下面，我們將介紹基質膠的包被涂層步驟，幫助您輕松應對各種細胞培養挑戰。

首先，讓我們來了解一下基質膠的解凍過程。將Biogradetech貨號A-MGL55高濃度無酚紅的基質膠在2-8°C的冰箱中過夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同，因此建議在解凍過程中將基質膠放在冰上保持低溫，以防止過早凝膠化。解凍后的基質膠在15°C以上的溫度下會迅速凝固，因此在使用時要保持冰上狀態，以避免不必要的凝膠形成。

Biogradetech貨號A-MGL55類器官專用的基質膠有許多應用場景，需要不同的厚度和濃度。例如，用于內皮細胞形成類似毛細血管的結構（管狀結構形成實驗）、大鼠主動脈組織分化為類似毛細血管的結構（主動脈環形成實驗）、上皮類器官形成或腫瘤類器官結構形成，需要較厚的凝膠，也就是厚層凝膠法。而一些應用，如原代細胞的傳代培養，需要薄層涂層而不是厚凝膠，因此應采用薄層凝膠法。

厚層凝膠法：

1.按上述方法解凍基質膠；

2.緩慢上下移液將基質膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3.向細胞培養板表面加入200-300μL/cm²基質膠，平鋪均勻，注意避免產生氣泡；

4.將培養板放置在 37 ℃，等待 30 min 形成凝膠即可使用。

薄層包被法：

1.按上述方法解凍基質膠；

2.緩慢上下移液將基質膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3.根據實驗需求使用預冷的培養基稀釋。建議將基質膠稀釋為1:100以用于原代細胞的擴增。對于您的應用，可能需要經驗性地確定最佳涂層濃度；

4.加入適量體積的該溶液覆蓋整個細胞培養板表面。建議加入300μL/cm²的溶液；

5.將培養板放置在室溫，孵育至少1h；

6.吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。

通過以上步驟，您可以根據不同的細胞培養需求，靈活選擇適合的基質膠涂層方法。無論是厚凝膠還是薄層涂層，都能為您的細胞研究提供穩定的3D培養支持，助您取得優異的實驗結果。趕快嘗試基質膠涂層方法，提升您的細胞培養實驗效果吧！  

類器官建立實驗操作示例：小鼠腸道類器官

小鼠小腸類器官原代的建立

1. 設備、試劑和耗材

1.1 設備：生物安全柜、移液器、二氧化碳培養箱、倒置顯微鏡、離心機（低速）；

1.2 試劑：基質膠（貨號：A-MGL03 / A-MGL55），小鼠腸道類器官試劑盒，DPBS，抗粘附漂洗液，青霉素-鏈霉素溶液，DPBS含0.1% BSA, 0.5M EDTA溶液（pH=8.0）；

1.3 耗材：無菌移液器槍頭、細胞培養板（例如本方案中的48孔）、細胞培養皿（直徑：3.5 cm、6 cm、10 cm）、無菌鑷子、無菌組織剪、70 μm濾網、手術刀、無菌EP管和其它耗材（或根據實驗設計進行調整）。

2. 實驗前準備

2.1 將Biogradetech貨號A-MGL55類器官專用的基質膠放入冰盒中，在4°C的冰箱中慢慢解凍過夜；（在操作過程中，不要讓產品升溫超過4°C。保持產品冷藏，并使用冰冷的溶液或細胞懸液稀釋。）

2.2 按照指示準備小鼠腸道類器官完全培養基。

2.3 準備充足的含有0.1% BSA的DPBS。

3. 實驗操作步驟

3.1 根據您實驗室批準的實驗動物倫理和操作規范，處死小鼠。

3.2 準備6cm培養皿，并加入冰冷的含有0.1% BSA的DPBS，備用。（置于冰上）

3.3 在無菌條件下，取出近胃端3~5cm的腸組織，放入“3.2”預冷的DPBS中。

3.4 縱向切開腸腔，輕輕刮去表面絨毛，清洗兩次，將小腸組織剪碎至2mm寬，再次清洗兩次，轉移到含有5mM EDTA的預冷DPBS中，消化20min（置于冰上）。

3.5 消化后，將組織碎片轉移到含有DPBS的新培養皿中清洗，并重復兩次以去除EDTA。

3.6 用抗粘附漂洗液沖洗5mL移液管。用含有0.1% BSA的DPBS重新懸浮腸碎片，上下移液3~4次，收集懸浮液，用70 μm濾網過濾。再重復一次這個步驟。

3.7 用300 g離心3 min收集隱窩，用1mL含0.1% BSA的DPBS重懸，取20 μL懸液進行鏡檢和隱窩計數。

3.8 完成計數后，吸取所需數量的隱窩懸液，300 g離心3min。

3.9 棄上清液，將隱窩重懸于基質膠中?；|膠應保持在冰上，以防止其凝固。盡快進行此過程。所使用的基質膠體積取決于沉淀的大小。大約應將70~100個隱窩懸浮在10μL的基質膠中。

注意：不要過度稀釋基質膠（基質膠稀釋比例應大于70%（基質膠體積/總體積）），否則可能會影響其結構穩定性。

3.10 將含有隱窩的基質膠點在48孔細胞培養板底部，每孔滴12 ~20 μL，位于孔中心。此步驟需盡快完成，因為基質膠可能會在管內或移液槍頭中室溫凝固。不要讓基質膠接觸到孔壁。

不同孔板所需的隱窩-基質膠混合物添加量如下表所示：

3.11 將培養板放入37°C二氧化碳培養箱中，孵育15min左右待基質膠凝固。

3.12 在基質膠完全凝固后，向48孔板中每孔加入250μL小鼠小腸類器官的完全培養基。將培養板置于37℃二氧化碳培養箱中培養。可根據經驗更換培養基，請密切監測類器官生長狀態。

Biogradetech是生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商。他們提供廣泛的產品組合，包括細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域的試劑。Biogradetech的產品受到全球生物研究機構和生物制藥公司的高度追捧，他們以高質量、可靠性和服務而聞名。 

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。其產品均在嚴格的全球標準下生產，Biogradetech還提供專業的技術支持，幫助客戶選擇正確的產品，并正確使用產品。Biogradetech致力于為客戶提供高質量的產品和服務，是那些尋求高質量試劑和可靠結果的人值得信賴的合作伙伴。 為了更好地滿足亞太地區客戶的需求并提升交付速度，Biogradetech在香港設立現貨中心，將能更迅速地滿足客戶的需求，確保訂單的高效處理，并加速產品的交付和配送，從而提供更快速、可靠的服務。 

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