Synaptic System：抗P2Y12抗體

SYSY抗P2Y12抗體：免疫組織化學（Immunohistochemistry，IHC）中的精準度提升

SYSY開發了一種高特異性的小鼠抗P2Y12單克隆抗體（貨號：476 011），該抗體具有優異的信噪比，稀釋度可達1:10,000。該抗體適用于多種組織制備方法，包括石蠟包埋組織（FFPE，IHC-P）（圖1）、標準PFA固定組織（IHC），以及甲醇后固定的新鮮冷凍組織（IHC-Fr）（圖2）。值得注意的是，抗體在甲醇固定后樣本中的表現優于許多現有的小膠質細胞標志物抗體。

為滿足多重染色的需求，擴展了產品線，推出了嵌合重組抗體。其中包括重組兔抗P2Y12（貨號：476 008）和重組豚鼠抗P2Y12（貨號：476 308）。所有的P2Y12抗體均為單克隆抗體，確保批次間變異最小化。

圖1：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 008，稀釋度1:5000，DAB顯色）對PFA固定石蠟包埋（FFPE）小鼠大腦皮層切片進行間接免疫染色。細胞核經蘇木精復染（藍色）。

圖2：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 308，稀釋度1:5000，綠色熒光）對甲醇后固定的小鼠腦新鮮冷凍切片進行間接免疫染色。細胞核經DAPI染色（藍色）顯示。

P2Y12受體是一種Gi蛋白偶聯嘌呤受體，在中樞神經系統（CNS）小膠質細胞功能中具有特別重要的意義。該受體在靜息態小膠質細胞的突起和胞體中均高表達，并在小膠質細胞對局部中樞神經系統損傷的趨化反應中發揮主要作用。近期研究表明，P2Y12受體富集于小膠質細胞突起與神經元胞體之間的接觸界面。迄今為止，P2Y12受體已成為最被廣泛認可的小膠質細胞特異性標志物之一，用于區分中樞神經系統駐留小膠質細胞與中樞神經系統相關巨噬細胞（CAMs）（圖3）以及浸潤的單核細胞/巨噬細胞。

圖3：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 011，稀釋度1:2000，綠色熒光）和兔抗CD163抗體（貨號HS-455 003，稀釋度1:125，紅色熒光）對甲醛固定的小鼠大腦皮層切片進行間接免疫染色。細胞核經DAPI染色（藍色）顯示。

圖4：使用豚鼠抗P2Y12抗體（貨號476 308，稀釋度1:10000，紅色熒光）和大鼠抗IBA1抗體（貨號234 017，稀釋度1:500，綠色熒光）對甲醛固定的APP/PS1小鼠海馬切片進行間接免疫染色。細胞核經DAPI染色（藍色）顯示。

ADP（腺苷二磷酸）是ATP（腺苷三磷酸）的降解產物，也是P2Y12受體的首選激動劑。ATP在正常生理活動或組織損傷時由神經元及其他膠質細胞釋放。在小膠質細胞中，當細胞進入一種稱為疾病相關小膠質細胞（DAM）的活化狀態時，P2Y12受體的表達水平會下調。這一現象可在APP-PS1轉基因小鼠（阿爾茨海默病的常用模型）的淀粉樣斑塊周圍區域觀察到（圖4）。相反，其他小膠質細胞標志物如IBA1、CD11b或CD11c在活化過程中則表達上調。

在外周系統中，P2Y12受體表達于血小板表面，因其在血小板活化、聚集和血栓形成中的關鍵作用，已成為抗血栓藥物的重要生物學靶點。

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文獻：

Cserép et al., 2020: Microglia monitor and protect neuronal function through specialized somatic purinergic junctions. PMID: 31831638

Deitmer et al., 2006: Modulation of synaptic activity in Purkinje neurons by ATP. PMID: 16527764

Dorsam and Kunapuli 2004: Central role of the P2Y12 receptor in platelet activation. PMID: 14755328

Haynes et al., 2006: The P2Y12 receptor regulates microglial activation by extracellular nucleotides. PMID: 17115040

Hashioka et al., 2022: Contribution of "Genuine Microglia" to Alzheimer's Disease Pathology. PMID: 35401156

Keren-Shaul et al., 2017: A Unique Microglia Type Associated with Restricting Development of Alzheimer's Disease. PMID: 28602351

Lin et al., 2020: The Safeguarding Microglia: Central Role for P2Y12 Receptors. PMID: 33519493

Weilinger et al., 2023: Pannexin-1 opening in neuronal edema causes initial cell death but also leads to protection via increased microglia contacts. PMID: 37742194