Mabtech：小鼠IFN-γ Elispot試劑盒

干擾素γ（IFN-γ）是一種二聚體可溶性細胞因子，是Ⅱ型干擾素類群中唯一的成員。IFN-γ具有抗病原體、免疫調節和抗腫瘤特性，能夠促進自然殺傷（NK）細胞的活性，增加抗原呈遞，激活誘導型一氧化氮合酶，誘導活化漿細胞產生IgG2a，并通過上調轉錄因子T-bet促進Th1細胞分化。鑒于該細胞因子在免疫反應中的重要作用，已有多種定量IFN-γ的方案。其中最簡單的可能是酶聯免疫吸附測定（ELISA），該方法通過抗體捕獲細胞因子，用于檢測血清樣本和組織培養上清液中細胞因子的水平。此外，還有基于流式細胞術的檢測方法，通過細胞通透化處理后，利用流式細胞術檢測細胞內IFN-γ。通常，含有該細胞因子的細胞比例較低，且無法表明該蛋白是否具有功能、是否會分泌，也不能判斷其是否針對特定抗原或多種抗原產生反應。為了檢測針對特定抗原的IFN-γ反應，研究者開發了細胞培養檢測法。在此方法中，CD4?和CD8?T細胞在抗原呈遞細胞（APC）和目標蛋白肽段的刺激下進行培養，隨后通過ELISA檢測上清液中的IFN-γ水平。

近年來，與ELISA相比，市面上出現了多種?基于流式細胞術的珠陣列分析方法（bead array assays），這些方法能夠更靈敏地在納克水平檢測低濃度細胞因子。然而，盡管這些檢測法能夠定量檢測分泌的總細胞因子，但無法區分是少數細胞產生大量細胞因子，還是大量細胞分泌少量細胞因子。分泌細胞因子的細胞數量反映了針對特定免疫靶標的細胞數量。因此，酶聯免疫斑點（ELISPOT）檢測法是一種高靈敏度的免疫檢測法，能夠在單細胞水平檢測細胞因子分泌細胞的頻率?？乖禺愋訣LISPOT檢測法能夠定量檢測特定細胞類型（CD4?或CD8?T細胞）針對特定抗原分泌IFN-γ的細胞數量。

在ELISPOT檢測板上，特異性針對IFN-γ的抗體能夠在細胞分泌后立即捕獲IFN-γ，其檢測下限通常可達10萬分之一的細胞。該檢測法的高靈敏度使其特別適用于研究特量細胞群體。

Elispot研究專家Mabtech提供的爆款小鼠IFN-γ Elispot試劑盒（3321-4AST-2, ELISpot Plus: Mouse IFN-γ (ALP)）備受科研用戶者的歡迎，該ELISpot 試劑盒用于通過ELISpot檢測法計數分泌IFN-γ的小鼠細胞。

將小鼠脾細胞（15萬個細胞/孔）在不含或存在刀豆蛋白A（ConA）的條件下孵育過夜，用ELISpot分析分泌IFN-y的細胞數量。

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