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細胞程序性死亡研究

發布者:艾美捷科技    發布時間:2021-07-27     
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程序性細胞死亡(Programmed Cell Death, PCD)是有機體在漫長的進化過程中發展起來的細胞自殺機制,在清除無用的、多余的或癌變的細胞,維持機體內環境穩態方面發揮重要作用。程序性細胞死亡調控機制的失調與多種疾病的發生發展相關,如神經變性性疾病、自身免疫病、惡性腫瘤、衰老、病原微生物感染、肌細胞功能失調等。多數學者將細胞的死亡形式分為凋亡性程序性細胞死亡(Apoptosis)、自噬性程序性細胞死亡(Autophagy)、細胞壞死(Necrosis)細胞焦亡等。


一、細胞凋亡

細胞凋亡(Apoptosis)一般是指機體細胞在發育過程中或在某些因素作用下通過細胞內基因及其產物的調控而發生的一種程序性細胞死亡過程。 

細胞凋亡的三個典型特征:

細胞處于不同的凋亡階段具有不同的生物學特征,典型的特征包括:1 )細胞膜PS(磷脂酰絲氨酸)外翻;2)線粒體膜電位喪失;3)細胞核濃縮和斷裂; 更多詳情:點擊查看>


細胞凋亡的不同檢測方式

早期檢測 PS(磷脂酰絲氨酸)在細胞外膜上的檢測細胞內氧化還原狀態改變的檢測細胞色素C的定位檢測線粒體膜電位變化的檢測
晚期檢測TUNEL法檢測LM-PCR Ladder (連接介導的PCR檢測)端粒酶檢測———
mRNA水平檢測Northern雜交檢測RT-PCR跑膠檢測——————


 

二、細胞自噬

自噬是細胞內分解代謝的一種途徑,細胞自噬其實分為三種方式,巨自噬,微自噬,分子伴侶介導自噬;更多詳情:點擊查看>


三、細胞焦亡

細胞焦亡(Pyroptosis)細胞焦亡是一種炎癥程序性細胞死亡,由各種病理刺激引發,如中風、心臟病發作、癌癥、微生物感染等。其它已知類型的程序性細胞死亡包括凋亡和壞死。

研究發現,細胞焦亡依賴于caspase-1,這從根本上將細胞焦亡與其它細胞死亡途徑區分開來。由于caspase-1是細胞焦亡途徑中的主要效應蛋白酶,因此caspase-1的活化是細胞發生焦亡的重要指標。細菌的多糖結構也會刺激caspase-4活化,發生細胞焦亡。


驗證如下指標描述
Gasdermin D細胞焦亡發生時,Gasdermin D(GSDMD,53KD)被切割,產生30KD左右的片段,可以購買GSDMD一抗,用Western blot(WB)來驗證。
Caspase-1、Caspase-4細胞焦亡發生時,caspase-1和caspase-4被激活,可以通過檢測caspase-1和caspase-4的活性來驗證。
IL-1β、IL-18細胞焦亡發生時,IL-1β和IL-18會釋放到細胞中,可以通過ELISA方法檢測細胞上清中的IL-1β和IL-18的含量來驗證。

同時,可以用掃描電鏡觀察細胞形態(細胞膜破裂、細胞膨大&變形、細胞器變形)。


細胞凋亡,壞死,細胞自噬和細胞焦亡的區別

區別條目細胞凋亡細胞壞死細胞自噬細胞焦亡
起因生理或是病理性刺激因子誘發病理性刺激因子誘發或是劇烈損傷營養缺乏或激素誘導病理性刺激
作用范圍單個細胞組織或是成群細胞單個細胞
細胞形態膜皺縮,體積變小體積膨大,變形產生空泡,形成自噬體體積膨大,變形
細胞膜保持完整直到形成凋亡小體破損膜結構完整破損
細胞器無明顯變化膨大和破損被自噬體吞噬,最終被溶酶體消化變形
基因組DNA規律性降解,呈片段化隨機降解,呈現彌散型隨機降解隨機降解
炎癥反應有,釋放細胞內含物伴隨著大量促炎癥因子的釋放
分子機制與蛋白酶caspases基因家族有關與蛋白激酶PIP3表達有關受LC3-II、Beclin-1和P62蛋白調控由GSDMD(gasdermin D)蛋白介導的細胞炎性壞死

 

產品推介:

一、細胞凋亡及檢測工具

1、膜聯蛋白V(Annexin V)及相關檢測試劑盒

貨號名稱產品描述
K109Annexin V-生物素凋亡試劑盒檢測細胞凋亡的早期/中期;區分凋亡和壞死
K102Annexin V-Cy3細胞凋亡試劑盒用流式或者熒光顯微鏡檢測凋亡情況,適用于GFP表達細胞的雙重染色
K103Annexin V-Cy5細胞凋亡試劑盒用流式或者熒光顯微鏡檢測凋亡情況
K104Annexin V-EGFP細胞凋亡試劑盒EGFP是一種明亮且光穩定的綠色熒光蛋白,在同時進行膜聯蛋白V-EGFP和PI染色時,該試劑盒可區分凋亡與壞死
K101Annexin V-FITC細胞凋亡試劑盒在同時進行膜聯蛋白V-FITC和PI染色時,試劑盒可區分凋亡與壞死
K201Annexin V-FITC細胞凋亡試劑盒PlusAnnexin VFITC Plus試劑盒包含sytox綠色染料(而非PI),該染料可對壞死細胞進行綠色熒光染色,其顏色高于FITC
K128Annexin V-PE細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-PE細胞凋亡檢測試劑盒包含易于檢測的亮橙色紅色PE熒光探針
K129Annexin V-PE-Cy5細胞凋亡檢測試劑盒檢測細胞凋亡的早期/中期;區分凋亡和壞死
1005Annexin V,人源重組未標記的膜聯蛋白V試劑可與任何選擇的標記物綴合

 

2. 細胞凋亡相關的抑制劑和誘導劑(待更新)

 

3. 組織蛋白酶:

貨號名稱產品描述
K140組織蛋白酶B檢測啟動或傳播凋亡信號的溶酶體組織蛋白酶B
K143組織蛋白酶D活性熒光分析試劑盒檢測啟動或傳播凋亡信號的溶酶體組織蛋白酶D
K145組織蛋白酶H活性熒光測定試劑盒檢測啟動或傳播凋亡信號的溶酶體組織蛋白酶H
E4620,E4621,E4622人/小鼠/大鼠組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒定量測量人/小鼠/大鼠血清,血漿,組織勻漿和其他生物液體中的組織蛋白酶K
K142組織蛋白酶L活性熒光測定試劑盒檢測啟動或傳播凋亡信號的溶酶體組織蛋白酶L
K144組織蛋白酶S活性熒光測定試劑盒檢測啟動或傳播凋亡信號的溶酶體組織蛋白酶S

 

4. Caspase蛋白酶家族:

 

貨號名稱產品描述
K111Caspase-1比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 1 酶相對活性
K117Caspase-2比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 2 酶相對活性
K106Caspase-3比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 3 酶相對活性
K127Caspase-4比色測定試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 4 酶相對活性
K123Caspase-5比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 5 酶相對活性
K115Caspase-6比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 6 酶相對活性
E4295-100Caspase-7(人類)ELISA試劑盒定量測定人血清,血漿,組織勻漿和其他生物液體中的Caspase-7
K113Caspase-8比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 8 酶相對活性
K119Caspase-9比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 9 酶相對活性
K125Caspase-10比色分析試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 10酶相對活性
K139Caspase-12熒光測定試劑盒檢測各類樣本中的Caspase 11酶相對活性

 

  1. 凋亡細胞分離試劑盒:

 

貨號名稱產品描述
K258凋亡細胞分離試劑盒使用膜聯蛋白V磁珠(MagBeads)從正常培養物中分離凋亡細胞,分離的凋亡細胞和正常細胞可以用于多種測定中以研究凋亡機制和途徑。

 

  1. DNA片段化檢測:

核小體間DNA片段化是哺乳動物細胞凋亡的標志,我們的凋亡DNA Ladder 抽提試劑盒提供了一種簡便而靈敏的方法來檢測凋亡細胞中的DNA片段。該試劑盒選擇性地提取了DNA 片段,同時沒有完整基因組DNA的干擾。

 

貨號名稱產品描述
K170凋亡DNA Ladder 抽提試劑盒可提取凋亡DNA 片段,而不會干擾完整的基因組DNA
K401ApoBrdU DNA片段檢測試劑盒(TUNEL法)基于TUNEL的分析試劑盒提供了完整的組件,包括陽性和陰性對照細胞,可方便地檢測培養的細胞和組織切片中的DNA片段,適用于流式細胞儀和熒光顯微鏡。
K404ApoBrdU Red DNA片段檢測試劑盒(TUNEL法)基于TUNEL的分析試劑盒提供了完整的組件,包括陽性和陰性對照細胞,可方便地檢測培養的細胞和組織切片中的DNA片段,適用于流式細胞。
K403ApoBrdU-IHC DNA片段檢測試劑盒(TUNEL法)基于TUNEL的分析試劑盒提供了完整的組件,包括陽性和陰性對照細胞,可方便地檢測培養細胞和組織切片中的DNA片段,適用于免疫組化。

 

  1. 線粒體分析:

凋亡過程中很多關鍵事件集中于線粒體,包括半胱天冬酶激活劑的釋放(例如細胞色素c),離子運輸的變化,線粒體跨膜電位的喪失,細胞氧化還原狀態的改變以及促凋亡和抗凋亡Bcl-2家族蛋白的參與。

 

貨號名稱產品描述
K250線粒體細胞凋亡檢測熒光試劑盒該試劑盒通過檢測線粒體跨膜電位的變化來區分健康細胞和凋亡細胞。
K257細胞色素c釋放細胞凋亡檢測試劑盒該試劑盒為檢測細胞凋亡過程中從線粒體到細胞溶膠的細胞色素c轉運提供了有效的手段。
K287細胞色素氧化酶活性比色分析試劑盒快速測量細胞色素氧化酶的酶活性。
K255ADP / ATP比生物發光測定試劑盒ADP / ATP比值測定可提供高度一致的結果,并且與其他凋亡標記物(例如基于TUNEL的測定和caspase測定)具有極好的相關性。
K239線粒體通透性轉化孔(MPT)檢測試劑盒線粒體通透性轉化孔(MPT孔或MPTP)是由線粒體內膜和內層膜的組分形成的非特異性通道,在細胞死亡過程中似乎參與了線粒體組分的釋放。在健康細胞中,MPTP在打開和關閉狀態之間閃爍,但在細胞死亡期間,MPTP會極大地改變線粒體的通透性。細胞色素c的釋放和線粒體膜電位的喪失是在連續的孔活化之后。

 

二、細胞自噬檢測工具

MTOR檢測試劑盒:

貨號

名稱

產品描述

K4179

mTOR (Human) ELISA試劑盒

定量測定血清,血漿,組織勻漿,培養上清液和其他生物液體中的mTOR

 

自噬抑制劑:

貨號

名稱

產品描述

 

2249

3-甲基腺嘌呤

3-甲基腺嘌呤常用作自噬螯合的特異性抑制劑,它通過抑制III型磷脂酰肌醇3-激酶(PI-3K)來阻止自噬體形成,從而抑制自噬

1685

ATM激酶抑制劑,KU-55933

KU-55933是ATM激酶的有效抑制劑,選擇性的和ATP競爭(Ki = 2.2 nM; IC 50 = 13 nM),它抑制DNA-PK,mTOR,PI 3-K,PI 4-K和ATR需要更高的濃度(IC 50分別為2500、9300、16600,> 100000和> 100000 nM)

B2260

 

Autophinib

Autophinib是一種有效的自噬抑制劑,它通過靶向作用于脂質激酶VPS34來抑制饑餓或雷帕霉素誘導的自噬。

1829

桿菌素A1

桿菌素A1一種體外高效的液泡H + -ATPases(V-ATPases)抑制劑,在動物細胞,植物細胞和微生物中納克級即可起作用;對其他ATP水解酶如F-ATP酶,Ca 2+ -ATP酶,Na + / K + -ATP酶和質膜H + -ATP酶也具有選擇性,通過抑制自噬小體和溶酶體之間的融合起作用,還可在后期防止自噬。

1825

氯喹二磷酸酯

抗瘧藥,通過不同于3-甲基腺嘌呤的機制抑制神經膠質瘤細胞的自噬。

1711

 

G? 6976

G? 6976是一種細胞可滲透的,有效的蛋白激酶C(PKC)抑制劑(IC 50 = 7.9 nM)。在體外,區分PKC的Ca 2+依賴性和非依賴性的同工型;選擇性抑制PKCα和PKCβ1(IC 50分別為2.3nM和6.2 nM),但不抑制PKCδ,-ε或-ζ的活性(IC 50> 3?M)

B2051

硫酸羥氯喹

羥氯喹是合成奎寧衍生物,通常用作抗瘧藥,羥氯喹還用于治療類風濕關節炎和盤狀或系統性紅斑狼瘡。它抑制自噬并誘導自噬細胞死亡(IC 50 = 30 ?M),表明其在研究和醫學中的潛在應用。

B2378

IITZ-01

IITZ-01是有效的溶血同性自噬抑制劑,表現出比氯喹(Cat:1825)強十倍的自噬抑制作用;增強自噬體的積累,但通過削弱溶酶體功能抑制自噬體的降解,最終導致自噬的抑制,顯示有效的抗癌活性。

B2117

Lys01三鹽酸鹽

Lys01 trihydrochloride(Lys05)是一種有效的水溶性溶酶體自噬抑制劑,在MTT分析中對1205Lu,c8161,LN229和HT-29細胞系的IC50值分別為3.6、3.8、6和7.9μM。

9419

MHY1485

MHY1485是一種mTOR激活劑,可通過抑制自噬小體和溶酶體之間的融合來有效抑制自噬。MHY1485處理可抑制基礎自噬通量,這種抑制作用已在饑餓中的細胞中得到了證實,饑餓是自噬的強大生理誘導劑。

B1286

SAR-405

SAR-405是一種有效的選擇性PIK3C3 / Vps34抑制劑,可防止自噬并與腫瘤細胞中的mTOR抑制協同作用。

2037

Spautin-1

Spautin-1是一種細胞可滲透性的,哺乳動物細胞中特異且有效的自噬抑制劑。它通過抑制兩個針對Vps34復合物Beclin1亞基的泛素特異性肽酶USP10和USP13來促進Vps34 PI3激酶復合物的降解。Spautin-1會阻斷癌細胞中的生存自噬途徑。

 

自噬誘導劑:

貨號

名稱

產品描述

1828

鹽酸胺碘酮

鹽酸胺碘酮是一種具有廣泛殺真菌活性的非選擇性離子通道阻滯劑,胺碘酮可導致啤酒酵母中Ca2 +立即流入,隨后線粒體破碎和細胞死亡,也充當自噬誘導劑。

B2297

AR7

AR-7,也稱為非典型類維生素A 7,是伴侶蛋白介導的自噬(CMA)有效的選擇性增強劑,充當RARα的化學激活劑。

2391

C2-二氫神經酰胺

C2神經酰胺的有用陰性對照(貨號2390-5,25),也充當自噬誘導劑。

2684

鹽酸可樂定

可樂定是一種降壓藥,可作為α2-腎上腺素能受體激動劑,可通過集中抑制交感神經活動來降低外周血管阻力,可樂定的抗高血壓作用也歸因于其對咪唑啉(I1)受體的激動作用(Ki = 4-8 nM),也可作為獨立于mTOR的自噬增強劑。

1686-5

多索嗎啡

多索嗎啡是一種細胞滲透性的,選擇性,可逆,具有ATP競爭性的AMP活化蛋白激酶(AMPK)抑制劑(在5 ?M ATP且無AMP的情況下,Ki = 109 nM),不僅影響包括JAK3,PKA,PKCθ,SYK和ZAPK在內的幾種與結構相關的激酶的活性,還抑制I型骨形態發生蛋白(BMP)受體(ALK2,ALK3和ALK6)。此外,最近,Dorsomorphin已顯示出通過不依賴AMPK抑制作用的Akt / mTOR途徑阻斷,在癌細胞中誘導保護性自噬。

2683

鹽酸洛哌丁胺

洛哌丁胺是一種止瀉藥,可作為非選擇性的Ca?2通道阻滯劑,在納摩爾濃度(Ki = 2 nM)下,洛哌丁胺與μ阿片受體結合,也可作為獨立于mTOR的自噬增強劑。

B1977-500

 

Rasfonin

Rasfonin是從Talaromyces sp中分離的,它是ras依賴性細胞中的選擇性凋亡誘導劑,Rasfonin誘導自噬并伴隨Akt磷酸化的上調。

1827-10

Rottlerin

Rottlerin最初報道為是對PKCδ具有選擇性的蛋白激酶C同工型抑制劑,然而,最近的研究表明,Rottlerin在體外不能阻斷PKCδ的活性,但能阻斷其他激酶和非激酶蛋白,并能高效激活多個Ca 2+敏感的K +通道,通過抑制mTORC1誘導自噬。

9580-5

SBI-0206965

SBI-0206965是選擇性的,細胞滲透性的自噬激酶ULK1抑制劑,它抑制ULK1激酶IC 50為108 nM, 抑制ULK2 IC 50為711 nM。SBI-0206965通過抑制細胞中ULK1介導的磷酸化事件,調節自噬和細胞存活。SBI-0206965與雷帕霉素(mTOR)抑制劑的機制靶標極大地協同作用,可以殺死腫瘤細胞。

1865-5

SMER28

SMER28是一種細胞滲透性物質,獨立于mTOR的機制,充當自噬的正調節劑,SMER28增加自噬體的合成并增強模型自噬底物如A53Tα-突觸核蛋白和突變亨廷頓蛋白片段的清除,它在亨廷頓舞蹈?。℉D)的果蠅模型中也具有保護作用。

2258-5

黃腐酚

黃腐酚是一種細胞滲透性的,生物活性類黃酮抗氧化劑,與含valosin蛋白的蛋白質(VCP)的N末端結構域結合,該蛋白質是自噬小體成熟的必需蛋白質。黃腐酚會抑制VCP的功能,從而損害自噬體的成熟并導致微管相關蛋白1輕鏈3-II(LC3-II)的積累。

 

自噬熒光染色試劑盒:

自噬熒光染色試劑盒

Cell Explorer 細胞自噬檢測熒光成像試劑盒(23001

Cell Meter 細胞自噬檢測試劑盒 綠色熒光(23002


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